Ak váš lekár odporučil test na karyotyp pre vás alebo vaše dieťa alebo po amniocentéze, čo to znamená? Aké podmienky môže karyotyp diagnostikovať, aké sú kroky potrebné na vykonanie testov a aké sú ich obmedzenia?
PASIEKA / SPL / Getty ImagesČo je to test karyotypu?
Karyotyp je fotografia chromozómov v bunke. Karyotypy sa môžu odobrať z krviniek, kožných buniek plodu (z plodovej vody alebo placenty) alebo buniek kostnej drene.
Stavy diagnostikované karyotypovým testom
Karyotypy možno použiť na skríning a potvrdenie chromozomálnych abnormalít, ako je Downov syndróm a syndróm mačacích očí, a je možné zistiť niekoľko rôznych typov abnormalít.
Chromozomálne abnormality:
- Trizómie, v ktorých sú skôr tri kópie jedného z chromozómov než dve
- Monosomie, v ktorých je prítomná iba jedna kópia (namiesto dvoch)
- Delécie chromozómov, v ktorých chýba časť chromozómu
- Translokácie chromozómov, pri ktorých je časť jedného chromozómu pripojená k inému chromozómu (a naopak pri vyvážených translokáciách.)
Medzi príklady trizómií patria:
- Downov syndróm (trizómia 21)
- Edwardov syndróm (trizómia 18)
- Patauov syndróm (trizómia 13)
- Klinefelterov syndróm (XXY a ďalšie variácie) - Klinefelterov syndróm sa vyskytuje u 1 z 500 novorodencov
- Syndróm trojitého X (XXX)
Medzi príklady monozómie patria:
- Turnerov syndróm (X0) alebo monozómia X - Zhruba 10% spontánnych potratov v prvom trimestri je dôsledkom Turnerovho syndrómu, ale táto monozómia sa vyskytuje iba u približne 1 z 2 500 živých narodených žien.
Príklady chromozomálnych delécií zahŕňajú:
- Cri-du-Chatov syndróm (chýbajúci chromozóm 5)
- Williamsov syndróm (chýbajúci chromozóm 7)
Translokácie - existuje veľa príkladov translokácií vrátane translokácie Downovho syndrómu. Robertsonské translokácie sú pomerne časté a vyskytujú sa u zhruba 1 z 1000 ľudí.
Mozaika je stav, keď niektoré bunky v tele majú chromozomálne abnormality, zatiaľ čo iné nie. Napríklad mozaikový Downov syndróm alebo mozaiková trizómia 9. Úplná trizómia 9 nie je kompatibilná so životom, ale mozaiková trizómia 9 môže mať za následok živé narodenie.
Keď je hotovo
Existuje veľa situácií, v ktorých vám môže lekár odporučiť karyotyp. Môžu to byť napríklad:
- Dojčatá alebo deti so zdravotným stavom, ktorý naznačuje chromozomálnu abnormalitu, ktorá ešte nebola diagnostikovaná.
- Dospelí, ktorí majú príznaky naznačujúce chromozomálne abnormality (napríklad muži s Klinefelterovou chorobou, môžu zostať nediagnostikovaní až do puberty alebo dospelosti.) Niektoré z porúch mozaikovej trizómie môžu tiež zostať nediagnostikovaní.
- Neplodnosť: Pre neplodnosť je možné vytvoriť genetický karyotyp. Ako bolo uvedené vyššie, niektoré chromozomálne abnormality môžu zostať nediagnostikované až do dospelosti. Žena s Turnerovým syndrómom alebo muž s jednou z variantov Klinefelterovej choroby si môžu byť vedomí tohto stavu až potom, ako sa vyrovnajú s neplodnosťou.
- Prenatálne testovanie: V niektorých prípadoch, napríklad pri translokácii Downovho syndrómu, môže byť ochorenie dedičné a rodičia môžu byť vyšetrení, ak sa dieťa narodilo s Downovým syndrómom. (Je dôležité si uvedomiť, že Downov syndróm väčšinou nie je dedičnou poruchou, ale skôr náhodnou mutáciou.)
- Mŕtvo narodenie: Karyotyp sa často robí ako súčasť testovania po mŕtvom narodení.
- Opakované spontánne potraty: Rodičovský karyotyp opakovaných spontánnych potratov môže poskytnúť informácie o dôvodoch týchto ničivých opakujúcich sa strát. Existuje názor, že chromozomálne abnormality, ako je trizómia 16, sú príčinou najmenej 50% spontánnych potratov.
- Leukémia: Testovanie karyotypov sa môže vykonať aj na pomoc pri diagnostike leukémií, napríklad hľadaním chromozómu Philadelphia u niektorých ľudí s chronickou myelogénnou leukémiou alebo akútnou lymfocytovou leukémiou.
Kroky zapojené
Karyotypový test môže znieť ako jednoduchý krvný test, vďaka čomu sa mnoho ľudí pýta, prečo trvá tak dlho, kým získajú výsledky. Tento test je po zbere skutočne dosť zložitý. Pozrime sa na tieto kroky, aby ste pochopili, čo sa deje v čase, keď čakáte na test.
1. Odber vzorky
Prvým krokom pri vykonávaní karyotypu je odber vzorky. U novorodencov sa odoberá vzorka krvi obsahujúca červené krvinky, biele krvinky, sérum a ďalšie tekutiny. Karyotyp sa uskutoční na bielych krvinkách, ktoré sa aktívne delia (stav známy ako mitóza). Počas tehotenstva môže byť vzorkou buď plodová voda odobratá počas amniocentézy, alebo kúsok placenty odobratý počas odberu vzoriek choriových klkov (CVS). Plodová voda obsahuje bunky kože plodu, ktoré sa používajú na generovanie karyotypu.
2. Transport do laboratória
Karyotypy sa vykonávajú v špecifickom laboratóriu nazývanom cytogenetické laboratórium - laboratórium, ktoré študuje chromozómy. Nie všetky nemocnice majú laboratóriá na cytogenetiku. Ak vaša nemocnica alebo zdravotnícke zariadenie nemá svoje vlastné cytogenetické laboratórium, testovacia vzorka sa odošle do laboratória, ktoré sa špecializuje na karyotypovú analýzu. Testovanú vzorku analyzujú špeciálne vyškolení cytogenetickí technológovia, Ph.D. cytogenetici alebo lekárski genetici.
3. Oddelenie buniek
Na analýzu chromozómov musí vzorka obsahovať bunky, ktoré sa aktívne delia. V krvi sa biele krvinky aktívne delia. Väčšina buniek plodu sa tiež aktívne delí. Len čo sa vzorka dostane do cytogenetického laboratória, nedeliace sa bunky sa oddeľujú od deliacich sa buniek pomocou špeciálnych chemikálií.
4. Rastúce bunky
Aby bolo k dispozícii dostatok buniek na analýzu, deliace sa bunky rastú v špeciálnom médiu alebo v bunkovej kultúre. Toto médium obsahuje chemikálie a hormóny, ktoré umožňujú bunkám delenie a množenie. Tento proces kultivácie môže trvať tri až štyri dni pre krvinky a až týždeň pre bunky plodu.
5. Synchronizácia buniek
Chromozómy sú dlhý reťazec ľudskej DNA. Aby bolo možné chromozómy vidieť pod mikroskopom, musia byť vo svojej najkompaktnejšej forme vo fáze bunkového delenia (mitózy) známej ako metafáza. Aby sa všetky bunky dostali do tohto špecifického štádia bunkového delenia, sú bunky ošetrené chemikáliou, ktorá zastaví bunkové delenie v mieste, kde sú chromozómy najkompaktnejšie.
6. Uvoľnenie chromozómov z ich buniek
Aby bolo možné tieto kompaktné chromozómy vidieť pod mikroskopom, musia byť chromozómy mimo bielych krviniek. To sa deje tak, že sa biele krvinky ošetria špeciálnym roztokom, ktorý spôsobí ich prasknutie. To sa deje, keď sú bunky na mikroskopickom sklíčku. Zvyšky zvyškov z bielych krviniek sa odplavia a chromozómy zostanú prilepené na podložnom sklíčku.
7. Farbenie chromozómov
Chromozómy sú prirodzene bezfarebné. Na rozlíšenie jedného chromozómu od druhého sa na podložné sklíčko nanáša špeciálne farbivo zvané Giemsa dye. Farbivo Giemsa farbí oblasti chromozómov, ktoré sú bohaté na zásady adenín (A) a tymín (T). Po zafarbení vyzerajú chromozómy ako struny so svetlými a tmavými pásmi. Každý chromozóm má špecifický vzor svetlých a tmavých pruhov, ktoré umožňujú cytogenetikovi rozoznávať jeden chromozóm od druhého. Každý tmavý alebo svetlý pás obsahuje stovky rôznych génov.
8. Analýza
Po zafarbení chromozómov sa sklíčko vloží pod mikroskop na analýzu. Potom sa urobí fotografia chromozómov. Na konci analýzy sa stanoví celkový počet chromozómov a chromozómy sa usporiadajú podľa veľkosti.
9. Počítanie chromozómov
Prvým krokom analýzy je spočítanie chromozómov. Väčšina ľudí má 46 chromozómov. Ľudia s Downovým syndrómom majú 47 chromozómov. Je tiež možné, že ľuďom chýbajú chromozómy, viac ako jeden chromozóm navyše alebo časť chromozómu, ktorá chýba alebo je duplikovaná. Pri pohľade iba na počet chromozómov je možné diagnostikovať rôzne stavy vrátane Downovho syndrómu.
10. Triedenie chromozómov
Po určení počtu chromozómov začne cytogenetik triediť chromozómy. Pri triedení chromozómov porovná cytogenetik dĺžku chromozómov, umiestnenie centromér (oblasti, kde sú tieto dve chromatidy spojené) a umiestnenie a veľkosti G-pásiem. Páry chromozómov sú očíslované od najväčších (číslo 1) po najmenšie (číslo 22). Existuje 22 párov chromozómov nazývaných autozómy, ktoré sa presne zhodujú. Existujú aj pohlavné chromozómy, ženy majú dva chromozómy X, zatiaľ čo muži majú X a Y.
11. Pohľad na štruktúru
Okrem pohľadu na celkový počet chromozómov a pohlavných chromozómov bude cytogenetik skúmať aj štruktúru špecifických chromozómov, aby sa ubezpečil, že v nich nechýba žiadny alebo ďalší materiál, ako aj štrukturálne abnormality, ako sú translokácie. K translokácii dôjde, keď je časť jedného chromozómu pripojená k inému chromozómu. V niektorých prípadoch sú dva kúsky chromozómov zamenené (vyvážená translokácia) a inokedy je pridaný alebo chýbajúci kúsok navyše iba z jedného chromozómu samotného.
12. Konečný výsledok
Nakoniec konečný karyotyp zobrazuje celkový počet chromozómov, pohlavie a akékoľvek štrukturálne abnormality s jednotlivými chromozómami. Digitálny obraz chromozómov sa generuje so všetkými chromozómami usporiadanými podľa počtu.
Limity testovania karyotypov
Je dôležité poznamenať, že zatiaľ čo testovanie karyotypu môže poskytnúť veľa informácií o chromozómoch, tento test vám nemôže povedať, či sú prítomné špecifické génové mutácie, ako napríklad tie, ktoré spôsobujú cystickú fibrózu. Váš genetický poradca vám môže pomôcť pochopiť, čo vám môžu testy karyotypu povedať a čo nie. Na vyhodnotenie možnej úlohy génových mutácií pri chorobách alebo spontánnych potratoch sú potrebné ďalšie štúdie.
Je tiež dôležité poznamenať, že niekedy nemusí byť karyotypové testovanie schopné zistiť niektoré chromozomálne abnormality, napríklad keď je prítomný placentárny mozaikizmus.
V súčasnosti je testovanie karyotypov v prenatálnom prostredí dosť invazívne a vyžaduje si odber plodovej vody alebo odber choriových klkov. Vyhodnocovanie bezbunkovej DNA vo vzorke krvi matky je však dnes bežné ako oveľa menej invazívna alternatíva prenatálnej diagnostiky genetických abnormalít u plodu.
Slovo od Verywell
Pri čakaní na výsledky svojich karyotypov môžete pociťovať veľkú úzkosť a týždeň alebo dva, kým získate výsledky, sa môžu cítiť ako veky. Nájdite si čas a opierajte sa o svojich priateľov a rodinu. Môže byť tiež užitočné oboznámiť sa s niektorými stavmi spojenými s abnormálnymi chromozómami. Aj keď mnohé z ochorení diagnostikovaných karyotypom môžu byť zničujúce, s týmito stavmi žije veľa ľudí, ktorí majú vynikajúcu kvalitu života.
